Электрофорез в полиакриламидном геле

Электрофорез в полиакриламидном геле

Электрофорез в полиакриламидном геле (сокр. электрофорез в ПААГ, ПААГ электрофорез; англ. PAGE, Polyacrylamide Gel Electrophoresis) — метод молекулярной биологии и биохимии, используемый для разделения белков и нуклеиновых кислот, основанный на движении заряженных биологических макромолекул в постоянном электрическом поле. Разделение в полиакриламидном геле происходит за счёт различий заряда разделяемых молекул и отличий молекулярных масс, а также от конфигурации молекул. Разделяют т. н. неденатурирующий, или нативный ПААГ-электрофорез (при котором разделяемые биологические макромолекулы в процессе электрофореза остаются в нативном состоянии) и денатурирующий ПААГ-электрофорез (при котором пробы предварительно денатурируют, в случае нуклеиновых кислот используют непродолжительное нагревание пробы с формамидом либо глиоксалем, для денатурации белков обычно используют кипячение пробы в буфере, содержащем сильный ионный детергент (обычно додецилсульфат натрия) и агент, разрушающий четвертичную структуру белка за счёт разрушения дисульфидных мостиков между глобулами белка и внутри полипептидной цепи — бета-меркаптоэтанолом). В процессе денатурирующего ПААГ-электрофореза молекулы сохраняются в денатурированном состоянии за счёт наличия в геле хаотропных агентов (обычно мочевины) в случае ПААГ-электрофореза нуклеиновых кислот и белков и наличия ионных (например додецилсульфата натрия, цетилтриметиламмоний бромида) и неионных (например tween-20) детергентов.

  • В случае электрофореза белков в полиакриламидном геле метод обычно используют в модификации Леммли (Laemmli)[1]
  • Также электрофорез в полиакриламидном геле применяют для разделения коротких фрагментов нуклеиновых кислот, например, ДНК-электрофорез, например, при секвенировании по Сэнгеру. Кроме этого, ПААГ-электрофорез применяют для визуализации в методах ПДРФ и ПЦР методе.
  • Различают также т. н. диск-электрофорез (от англ. discontinious), при котором в геле в процессе электрофоретического разделения белков на границе между концентрирующим и разделяющим гелями создаётся градиент pH, за счёт чего достигается лучшее разделение белковых молекул.

См. также

Примечания

  1. ↑ U. K. LAEMMLI. Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T4. Nature,1970; V.227, P.680 — 685


Цинковый палец

Wikimedia Foundation. 2010.

Игры ⚽ Нужен реферат?

Полезное


Смотреть что такое "Электрофорез в полиакриламидном геле" в других словарях:

  • электрофорез в полиакриламидном геле — Один из наиболее распространенных в биологии методов электрофореза (наряду с методами электрофореза в крахмальном и агарозном геле), в котором в качестве дисперсионной среды используют гели полиакриламида, преимущества которых связаны с… …   Справочник технического переводчика

  • электрофорез в полиакриламидном геле — polyacrylamide gel electrophoresis электрофорез в полиакриламидном геле. Oдин из наиболее распространенных в биологии методов электрофореза <electrophoresis> (наряду с методами электрофореза в крахмальном и агарозном геле), в котором в… …   Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.

  • электрофорез в полиакриламидном геле в условиях денатурирации — — [http://www.dunwoodypress.com/148/PDF/Biotech Eng Rus.pdf] Тематики биотехнологии EN denaturing polyacrylamide gel electrophoresis …   Справочник технического переводчика

  • Электрофорез белков в полиакриламидном геле — Фотография полиакриламидного геля, иллюстрирующая разделение белков по молекулярной массе. Маркеры на левой дорожке У этого термина существуют и другие значения, см. Электрофорез в полиакриламидном геле. Электрофорез белков в полиакриламидном… …   Википедия

  • Электрофорез в пааг — Электрофорез в полиакриламидном геле (сокр. электрофорез в ПААГ; англ. PAGE, Polyacrylamide Gel Electrophoresis)  метод молекулярной биологии, используемый исследователями для разделения белков и нуклеиновых кислот. В случае электрофореза белков… …   Википедия

  • Электрофорез белков в ПААГ — Фотография полиакриламидного геля, иллюстрирующая разделение белков по молекулярной массе. Маркеры на левой дорожке Электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (SDS PAGE, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel… …   Википедия

  • Электрофорез по Леммли — Фотография полиакриламидного геля, иллюстрирующая разделение белков по молекулярной массе. Маркеры на левой дорожке Электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (SDS PAGE, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel… …   Википедия

  • Электрофорез ДНК — Фотография агарозного геля после ДНК электрофореза. Левая дорожка  фрагменты ДНК известной длины …   Википедия

  • Электрофорез нуклеиновых кислот — Фотография агарозного геля после ДНК электрофореза. Результат электрофоретического разделения продуктов ПЦР реакции. Агарозный гель окрашен бромистым этидием. Визуализация посредством облучения ультрафиолетом с длинной волны 312нм. ДНК… …   Википедия

  • Электрофорез белков — У этого термина существуют и другие значения, см. Электрофорез белков в полиакриламидном геле. Электрофорез белков способ разделения смеси белков на фракции или индивидуальные белки. Электрофорез белков применяют как для анализа компонентов смеси …   Википедия


Поделиться ссылкой на выделенное

Прямая ссылка:
… Нажмите правой клавишей мыши и выберите «Копировать ссылку»